Miceo western 服務 Q & A
1.     Q:多少量細胞?
A:每個sample至少 100μg. 因點樣時,每個sample最少需20μl(要放在384孔盤) .若濃度為 5mg/ml 則每個spot約為 5mg/ml*45 nl= 225 ng.
一個10cm petri dish 的cell量應足夠。
 
2.      QTotal protein 定量?         
A:目前Total protein 定量是將sample與已知濃度的 BSA 同時點樣在membrane上,以CBC染色後,以 800nm laser san,做出standard curve並計算sample濃度。
 
3.      Q:抗體稀釋倍率?
A:目前除了 internal control (actin)外,一律500倍稀釋。
 
4.      Q如何分析?
A:以Odyssey軟體分析。
     圈選 samples 及background,得到 I.I.值 (intensity)(background=0)。
          再分別除以 actin 來 normalize concentration.
公告日:2011/07/20