一、服務對象

本實驗室以服務國家衛生研究院各實驗室，及與本院有合作計畫之學術研究機構為主。收費可利用院內計畫或是國科會計畫扣款。

二、服務項目暨收費標準

※關於MRM定量收費說明：

1. 收費以小時計算，每小時200元整，未滿一小時，以一小時計算計費。
Ex. 共花費5小時10分鐘，以6小時計費。

2. 計費時間包含標準品測試、標準品檢量線、樣品分析、各樣品間洗滌的時間，以及全部上樣後的洗滌時間。

3. 目前初估標準品檢量線分析時間約為4小時，但是會因為預檢測幾種標準品，和標準品的特性，而最後的分析時間有所不同。

4. 以一個樣品，進樣三次，並包含每次進樣後的洗滌，大約花費1小時。若樣品比較髒，中間的洗滌時間會加長。

5. 收費計算舉例：

以簡單的標準品檢測一個樣品為例，
標準品檢量線4小時+樣品分析時間1小時=共5小時；
全部上樣後的洗滌時間另計。

三、送件流程 

• 小分子/蛋白質/胜肽鑑定

1. 以電話或面談的方式與蛋白質核心聯繫，進行送件前諮詢。

2. 經討論後確定送件項目與估計費用。

3. 使用者於線上預約系統填寫服務申請單 (請參考如何申請) 。

4. 列印服務申請單，請實驗室主持人簽名。

5. 備妥服務申請單及樣品，送至蛋白質核心實驗室(R2-5217) 。

6. 依照收件順序給予服務，並於服務完成後寄發檔案予使用者。

• UPLC-MS-MRM (小分子定量服務)

1. 以電話或面談的方式與蛋白質核心聯繫，進行送件前諮詢。

2. 經討論後確定送件項目與估計費用。

3. 使用者於此下載服務單，填寫完畢後，請實驗室主持人簽名。

4. 備妥服務申請單及樣品，送至蛋白質核心實驗室(R2-5217)。

5. 依照收件順序給予服務，並於服務完成後告知使用者總共使用時數。 

四、建議相關樣品前處理之方法

1. 小分子

 metabolite extraction protocol

2. 蛋白質

in-gel digestion (coomassie stained)

in-gel digestion (silver stained--H₂O₂) 

in-gel digestion (silver stained--K₃[Fe(CN)₆]+Na₂S₂O₃·5H2O)

in-solution digestion

Zip-Tip purification

 

五、送測樣品注意事項

送件請注意：送件前請務必詳加閱讀說明，如有違反注意事項規定造成數據不佳，將由送件者自行承擔！

1. 小分子樣品

(1) 送測樣品請進行適度純化處理，盡量降低鹽類與大分子含量。
(2) 純化過程依樣品之特性，請參考相關文獻。
(3) 一般簡易純化萃取過程宜在低溫（4 ~25℃）下進行，以配成含80% MeOH之樣品溶液下進行沉澱，過濾與提取。
(4) 提取物請儘速進行減壓除去有機溶劑，同時含水部份進行冷凍乾燥除水等濃縮步驟，並將處理完之產物（待測物）儲藏於-80℃冰箱。
(5) 待測物如需避光請儲藏於褐色瓶並請於送測前詳細告知。
(6) 未盡事宜，請洽詢實驗室人員。

2. 蛋白質、胜肽

(1) 請先將蛋白質水解溶液經ZipTip純化完畢，並乾燥後，連同申請書送至本中心，經服務人員收件後，依照收到樣品順序給予服務。

(2) 樣品準備注意事項：

a. 樣品製備過程請務必全程帶無粉手套，並穿著實驗衣，以避免角質素(Keratin)汙染而影響質譜分析結果。
b. 製備膠體之區域及器具(玻璃, 盒子, 刀片…等)需使用酒精擦拭。
c. 進行膠內水解時，請務必確認完全退染，避免樣品受染劑汙染。
d. 樣品中不可含有detergent，請務必移除。
e. 請盡量降低鹽類含量，務必使用ZipTip去除鹽類與雜質。本實驗室有提供分裝服務，相關操作方式可洽詢實驗室人員。

(3) 本中心提供「Mascot蛋白質資料庫」給院內使用者進行搜尋比對，請洽詢管理者 姚文雅博士 / 賴姿嘉 (#33709)
(4) 未盡事宜，請洽詢實驗室人員。

3. 其他注意事項

(1) 為避免汙染環境，恕不接受病毒、有毒性與放射性樣品。
(2) 請詳實填寫申請表上各項資料欄。若因資料不實，導致意外或儀器受損者，將視情節輕重，提出賠償要求或暫停使用人之申請權。
(3) 因中心的儲存系統有限，實驗原始數據僅代為保存6個月，超過時限將會刪除，無法提供數據查詢。
(4) 致謝原則說明：
a. 屬於「蛋白體化學分析核心設施」表列之服務項目，主要以服務方式執行，於成果發表時，核心設施不會要求服務提供者為共同作者，但使用者須於論文致謝欄中載明致謝。
b. 【建議『致謝』書寫方式】

# Proteomic mass spectrometry analyses were performed by the Core Facilities for Proteomics and Chemistry Research located at the Institute of Research Building, Research Facility for Sharing at NHRI

# Mass spectrometry analyses were performed by Research Facility for Sharing for Proteomics and Chemistry located at the Institute of Biological Chemistry, NHRI.

# Mass spectrometry analyses were performed by Research Facility for Sharing at NHRI, Taiwan (Core Facilities for Proteomics and Chemistry)

六、分析結果

1. 上樣後2星期內會寄發data給送件者，若送測樣品數量較多，或是樣品較為複雜，而無法在2星期內完成時，會提前告知送件者，敬請見諒。

2. 本實驗室所分析的data，僅提供做為學術研究，請勿做為商業用途，若有送件者將data做為商業相關用途，本實驗室一律不允與背書。